×
Log in to StudySoup
Get Full Access to Clemson - Study Guide - Midterm
Join StudySoup for FREE
Get Full Access to Clemson - Study Guide - Midterm

Already have an account? Login here
×
Reset your password

CLEMSON / Biology / BIOL / Binds to heme containing proteins, such as hemoglobin in the blood.

Binds to heme containing proteins, such as hemoglobin in the blood.

Binds to heme containing proteins, such as hemoglobin in the blood.

Description

School: Clemson University
Department: Biology
Course: Cell Biology
Term: Spring 2019
Tags: cellular biology, Membrane Biology, Chapter 7 biology Notes: Plasma Membrane and What Moves Across it., passive diffusion, facilitated diffusion, active diffusion, Cystic fibrosis, transmembraneproteins, Lipids, phospholipids, Protein function, and concentration gradients
Cost: 50
Name: BIOL 4610
Description: This study guide contains all of the notes from the cell biology lectures from the first two weeks of class. More specifically it contains the two powerpoints which are uploaded to the professor's CANVAS page.
Uploaded: 01/27/2019
16 Pages 4 Views 6 Unlocks
Reviews

javierm (Rating: )



Cell Biology Study Guide Exam 1


Binds to heme containing proteins, such as hemoglobin in the blood.



Foundations in Cell Biology

Whole Cell Techniques 

∙ Microscopy 

o Magnification 

 Projection lens x Objective lens = total magnification

 Magnification is a function of the microscope, which means that it is  preset.

 The objective lens is the first level of magnification and the projection  lens is additional magnification, however it is usually no more than 10x 

magnification. 

 The specimen on the specimen stage must be transparent and extremely  thin in order to allow the light to pass through and be seen by the 

individual using the microscope. 

o Resolution

 Resolution (D) is the ability to distinguish two objects from one another.  ∙ You want the minimum distance between two objects to be 

achieved. 

 The resolution in light microscopy is limited by the wavelength ( λ ) of  visible light, which is 0.45 micrometers (violet) to 0.70 micrometers (red). This means that any beam of radiation cannot be used, it must be on the 


What is confocal pinholes?



visible light spectrum. 

 The distance between the two objects must be greater than or equal to the  resolution of the microscope. 

∙ If the resolution is X micrometers, the distance between the two 

objects must be greater than or equal to X micrometers

 The equation to calculate the resolution of a microscope is  D=0.61 λ Nsinα

where  Nsinα  is the Numerical aperture. The numerical aperture 

depends on the microscope. 

∙ N is the refractive index of the fluid or the air between the object 

and the objective lens. 

∙ α  is the angular aperture, which is actually half of the angle 

from the specimen plane to the objective lens.

 The best resolution that can be obtained from a light microscope is about  0.2 micrometers. 

o Sample Preparation If you want to learn more check out econ 102 unlv

 Fixation: freezing the sample, because cells are dynamic (which means  they are always in motion)


What are the major types of lipids?



∙ Cross­linking macromolecules

o Kills the cell

o Common agents: glutaraldehyde and formaldehyde (which 

forms covalent bonds with free amino groups, such as the 

N or C terminus and side chains) 

∙ Partially permeabilizes cells, making the cells susceptible to  staining. 

 Embed or Section (required for thick specimens only) 

∙ Done using embedding wax or resins, then the specimen is cooled  or polymerized. Don't forget about the age old question of chem 111 exam 3

∙ This gives the cell more structural integrity, which is important  when the cell is sectioned

∙ Sectioning is done using a microtone, which is similar to a meat  slicer seen at delis. 

 Staining

∙ Common stains include:

o Hematoxylin, which is a nuclear stain that appears blue/ 

violet. It is a base that binds to acids, such as DNA; thus, it 

tends to make the nucleus of cells appear blue. 

o Eosin, which is an acid that binds to base, such as proteins 

present in the cytoplasm causing the cytoplasm of a cell to 

appear pink.

o Benzidine binds to heme containing proteins, such as 

hemoglobin in the blood. 

o Hematoxylin and eosin, H&E, are commonly combined 

during the staining process in order to create a contrast 

between the cytoplasm and the nucleus of a cell. 

∙ The darker the stain, the higher presence of the protein in that  location, this is because the stain has more substance to bind to. 

o Light Microscopy 

 bright field

∙ Advantages:

o Simple and inexpensive

o No staining is required

o Allows for live cell imaging

∙ Disadvantages:

o Very low contrast for most biological samples, which 

makes the organelles difficult to separate

 Cells are 70% water and 30% of everything else, 

which allows them to be transparent without string 

contrast. 

o Low apparent optical resolution because of the blur of out 

of focused materials on the specimen lens.  Don't forget about the age old question of Where does the end of the product life cycle fit in?

∙ However, there are optical, physical, and biochemical ways to  improve the limitation of the bright field light microscope. 

 phase contrast uses dark and light bands to allow more intracellular details to be seen

 DIC, differential interference contrast microscopy, illuminates the sample  from the top and sides which results in shadows, creating a seemingly 3­D  effect 

∙ pseudorelief

o Fluorescence Microscopy 

 The key of this technique is that the fluorescent compound absorbs light at one wavelength and emits light at a longer wavelength.

∙ Excitation λ is the wavelength at which the fluorescent compound absorbs the light. 

∙ Emission λ is the wavelength at which the fluorescent compound  emits the light; this value is always larger than the excitation  If you want to learn more check out the central force that motivates us to mature is

wavelength. 

 A common compound used for this technique is fluorescein, which is  excited around 492nm and emits around 525nm. 

 This technique requires a specific microscope and staining; however, it  does have its limitations. A major issue with this technique is 

autofluorescence.

∙ This problem is fixed by choosing a filter that blocks all light  except for the wavelength being emitted by the target fluorescent  compound. By angling the dichroic mirror a certain way, the  Don't forget about the age old question of the cells that produce testosterone in the testis are called ________.

unwanted light can be blocked from the spectators view in the 

microscope. 

o Immunofluorescence Microscopy exploits the antibodies (proteins that are  produced by B cells that will recognize and bind to foreign antigens present in the body at any time).  We also discuss several other topics like jeffrey morgan uh

 The step by step process is as follows:

∙ This is usually done by inserting Protein X into a rabbit

which will elicit the B cells to create an antibody that

can recognize and bind to this target protein. 

∙ The antibodies are then collected by isolating the serum from the  rabbit about 8 to 10 weeks after injection. 

∙ This antibody is then injected into the cell and binds to the target protein X. Then, a second antibody is created which has a

fluorescent tag on it and specific for the primary antibody. 

X

∙ This second antibody will recognize the opposite end of the 

primary antibody, which will allow the location of the target 

protein to be seen through fluorescence microscopy.  

 A secondary antibody is used because it is expensive to add a fluorescent  tag to a primary antibody because the process causes half of the antibodies to be denatured. Also, using a secondary antibody allows multiple  secondary antibodies to attach to a single primary antibody, resulting in an amplification of fluorescence. 

 All primary antibodies must be derived from different animals, thus if  you want to label the nucleus red and the cytoskeleton blue, the red label  could attach to the rabbit derived antibody and the blue label could attach  to the chicken derived antibody. 

o

o Live Cell Imaging 

o Confocal Microscopy or confocal laser scanning microscopy (CLSM), uses  ordinary and fluorescent light to illuminate and focus on a thinly sliced specimen  at a specific location, allowing for more detail to be shown.

 Confocal pinholes allow only a small amount of light through, allowing  the light from the point of focus to be seen and all of the light outside of  the point of focus to be rejected (because it cannot come back through the  pinhole). 

 The laser allows the thinly sliced specimen to be penetrated with light,  thus thick specimens cannot be used for this technique which causes all 3­ D information to be lost.

o Fluorescence Resonance Energy Transfers (FRET) are based on the distance  between two fluorescent protein molecules. 

 The distance between these two proteins must be less than or equal to 10  to 100 angstroms in order for one fluorophore to absorb the light emitted  from its neighboring protein. This results in the initial emission 

wavelength to be the excitation wavelength of the other, when the two  components are within the optimal distance range. 

∙ The final emission wavelength will be a mixture of the two 

fluorescent colors. Thus, if FRET occurred between a CFP (blue)  and a YFP (yellow) the final emission color would be green. 

 This type of interaction can also occur intramolecularly. If a single protein contains two fluorescent compounds but is then phosphorylated (or  another adjustment resulting in a conformational change) the two  compounds can be brought into an optimal distance resulting in FRET to  occur (see slide 44). 

o Fluorescence Recovery after Photobleaching (FRAP), utilizes the dynamic of  movement and flow in the cell. 

 The target protein is fluorescently labeled and then bleached with a laser;  the photobleaching causes the label to lose the ability to fluoresce. After  this you wait to see if the protein’s fluorescing ability recovers in the  bleached section of protein, indicating the proteins mobility.

∙ The time that it takes the protein to recover will indicate the 

mobility of the protein.

∙ This data is quantified in a graph (see slide 48), comparing the  fluorescence before and after bleaching. Once the slope of the line  reaches 0, which is a flat line, that indicates that all the protein is  anchored. This value will allow you to quantify the percentage of  protein that is mobile in the cell. 

o There are ion sensitive fluorescent dyes, this means that the color of the  fluorescence changes depending on the concentration of ions in the cell.   For example, Fura­2 is dependent on calcium concentrations in the cell:  low [Ca] fluoresces blue, medium [Ca] fluoresces green, and high [Ca]  fluoresces yellow/ orange/ red. 

o Electron Microscopy 

 Transmission electron microscopy uses a beam of electrons, which have  a wavelength much shorter than visible light, as radiation. This 

microscope has a resolution about 2000x better than a light microscope,  due to the small wavelength emitted by electrons. 

∙ The resolution of an electron microscope is 0.1nm. 

∙ This microscope is built in an almost identical manner as the light  microscope, except the radiation beam is electrons, not visible 

light. 

∙ Specimen preparation for the electron microscope (same steps as a  light microscope):

o Fixate by using glutaraldehyde and osmium tetroxide, 

which binds and stabilized the lipid bilayers.

o Embed by dehydrating the cell and placing it in a solid 

plastic block. 

o Section the cell into extremely thin widths of about 50nm to

100nm, because electrons have limited penetrating power. 

This results in the loss of 3­D image potential. 

∙ The resulting contrast in the image is caused by the organelle’s  ability to deflect electrons, this phenomenon is cause by the 

osmium tetroxide. 

o A larger atomic number indicates a higher probability of 

electron scattering, thus causing the organelle or section of 

the cell to be a darker color because little to no electrons 

are able to pass through. 

o A darker section also indicates that it had a greater ability 

to pick up the osmium tetroxide stain than the lighter parts 

of cell produced in the image. 

 Immuno­electron microscopy uses a secondary antibody, which is 

labeled with gold, to bind to specific target proteins. 

∙ Gold is extremely good at deflecting electrons, which means 

anything bound with this labeled antibody will appear as a dark dot

on an image. 

∙ This method is usually mixed with osmium tetroxide staining to 

create varying contrasts in the image. 

 Scanning electron microscopy uses whole cells or unsectioned tissue  specimen that are fixed, dried, and coated with a heavy metal that can 

deflect electrons, resulting in a 3­D image of the specimen. 

∙ This technique requires a detector that will send the collected data 

to a viewing screen and arrange it in a viewable manner. 

∙ The 3­D perspective of the structure is gained, however the ability 

to have a high resolution is lost. 

 Cryoelectron tomography uses a rotating stage that can be tilted to 

collect images of all sides and angles of the specimen, which are then 

transmitted to a computer that will allow the visualization of a 3­D image. ∙ This technique does not require fixation or staining, it uses 

specimens frozen by liquid nitrogen in aqueous solutions.

Isolating Cells from Tissues 

∙ Physical properties, such as density

∙ Physiological properties, such as affinity for a specific substance.

∙ FACS, Flow cytometry, which separates different cell types by taking advantage of cell  surface antigens and sorting them through a machine that orders the cells in a single file  line. The target antigen is labeled with both red and green fluorescent antibodies, these  cells then gain a negative charge which passes through an electronic field and sorts the  various cell types based on charge. 

o The process ‘thinks’ of these questions: Is it a cell? Is it fluorescent? Is it red? Is it green? Is it both?

o This information is collected and recorded in a graph (see slide 72) where each  individual dot represents a single cell

Cell Culture

∙ Most cells can be cultured in the lab if the medium has the appropriate conditions and nutrient requirements. 

o A rich medium is desired, this contains: 9 essential amino acids, vitamins,  peptide and protein growth factors, and a negatively charged solid surface.  The peptide and protein growth factors are usually supplied by the  addition of fetal calf serum. 

 The negatively charged solid surface is required because it mimics 

the extracellular interactions of an animal cell, which will allow for 

ample cell growth.  

∙ Primary cell cultures are cells that are prepared directly from the tissues of an  organism. These cultures usually display the differentiated properties of the organs  from which the cells were isolated. However, primary cells cannot divide an  unlimited about of times, they can only double about 50 to 100 times before they die.  (see slide 76)

∙ Transformed cells are cells that are derived from a tumor or another cell that has  undergone spontaneous genetic change, this allows the cell to grow and divide  indefinitely in culture, grow to high densities on a plate, and a solid surface is not  required. These cells have gone through an oncogenic transformation. However, these cells will not necessarily mimic the organism from which they were isolated from.  Techniques Addressing the Perturbation of Cellular Function 

∙ Pharmacological methods

o Drugs and inhibitors are commonly used in cell biology in order to inhibit the  function of specific organelles or proteins in cells. 

o Some examples include: Brefeldin A inhibits the function of the Golgi apparatus,  cytochalasin A inhibits actin in muscle cells, and Nocodazole inhibits the  microtubules in muscle. 

o Latruculin B inhibits the actin function in muscle; as Latrunculin B is increased  the percentage of phagocytosis decreases, which indicates that actin is important  in phagocytosis (see slide 81). 

∙ Genetic methods

o At the level of protein

 Dominant negative involves a mutation in the wild­type allele that will  still allow the new mutant protein to bind to the enzyme, however it will 

not elicit a response. 

∙ The expression of a dominant negative version will compete with 

the wild type protein. 

∙ See slide 84.

o At the level of RNA

 RNAi targets and degrades the message therefore reducing the number of  proteins produced. This causes the mRNA to go through on of the 

following processes:

∙ In vitro production of dsRNA: the sense and antisense transcript 

will find each other, resulting in dsRNA which is targeted by a 

dicer and destroyed

∙ In vivo production of dsRNA: the mRNA will fold over on itself 

and produce a hairpin structure that resembles dsRNA which is 

targeted by a dicer and the message is destroyed. 

∙ RISC chops up the dsRNA because it thinks that it is a virus 

invading the cell. 

o At the level of the genome

 Gene replacement involves homologous recombination that will switch  or “knock out” a specific sequence with a mutant sequence. This allows a  new sequence to be inserted into the cell’s genome, however it does not 

work efficiently in all cells

 CRISPR­CAS9 is an error prone repair that usually results in a frame  shift, thus causing problems when building the protein from the amino 

acids. 

∙ CAS9 is a nuclease that allows a single gene to be targeted and 

either knocked out or replaced or a new gene to be inserted. 

∙ This method relies on guide RNA. 

∙ Allows for whole genome editing to be achieved.

o Highly debated, especially in the current media due t the 

researcher in China that claims he removed the CCR5 

antigen on the surface of T cells, which will eliminate the 

HIV’s ability to enter the cell. However, all organisms 

contain the CCR5 antigen on the T cell surface, thus the 

consequences of its removal are unknown.  

Techniques Addressing the Purification and Characterization of Organelles ∙ Purification of organelles

o Centrifugation techniques

 The cells are centrifuged. This method is more specifically called 

Differential Velocity Centrifugation, which utilizes the density of each  organelle in order to sediment each one around its corresponding density.

 Then the remaining organelle fraction goes through Equilibrium Density Gradient Centrifugation. Using a linear or step gradient of sucrose the 

fraction is centrifuged again; however, this time the organelle will remain  in the section that is equal to its density. 

 Finally, the fractions of each density are collected in sections of unique  densities. 

o Purification of endosomes by magnetic fractionation

 This is a one­step purification process!

 Endosomes are phagocytic cells

 Steps:

∙ Endosome will engulf an inert iron particle into their phagocytes. 

∙ The cell is then lysed, allowing the phagocytes and other 

organelles to homogenate. 

∙ The mixture is then run through a steal wire column attached to an 

electromagnet. 

∙ When turned on, the electromagnet will catch the endosome’s 

phagocytes that contain the iron particle, allowing all other cell 

debris to flow through the column. 

∙ When turned off, the iron particles will no longer be attracted to 

the magnet which will cause the phagocytes to flow through the 

column. This gives a pure sample.

Internal Organization of the Cell

Cell Membranes 

∙ Important, but not all, membrane functions are as following

o Selective permeability

o Compartmentalize

o Localize biochemical reactions

o Membrane Proteins

 Respond to signals, energy transduction, ATP synthesis, and structural  anchors.

o Membranes limit the cell in both eukaryotes and prokaryotes

∙ Major components of Cell membranes

o Lipids 

 Lipids are amphiphilic (polar) molecules

∙ Hydrophilic head

∙ Hydrophobic fatty acid tails

 A fatty acid tail is saturated when it is comprised of all single bonds.  However, if the fatty acid chain has at least one double bond it is 

considered unsaturated. 

∙ 50% of all fatty acid tails are unsaturated. 

∙ When the tail is bent, as indicated above, that indicates that there is a double bond, which causes the whole direction of the tail to bend.

 They are great building blocks for biological membranes

∙ Why are lipids such a great building block?

o Because they are amphiphilic; they can spontaneously form

higher order structures where the hydrophobic tail is on the 

inside to avoid the aqueous solution, and the hydrophilic 

head is in the solution. 

o They can form micelles or bilayer sheets, or monolayers.

o The type of higher order structure that will form is 

determined by the individual phospholipid structure.

o Proteins

∙ Major types of Lipids

o Phospholipids

 Hydrophilic head: Glycine (this position varies), phosphate, Glycerol  Hydrophobic tails: long fatty acid chains

 Common Phospholipids include: Phosphatidyl­ethanolamine, 

phosphatidyl­serine, phosphatidyl­choline, and phosphatidylinositol.

∙ Phosphatidyl­ethanolamine and phosphatidyl­choline have a net 

neutral charge.

∙ Phosphatidylinositol is not important to an organism’s structural 

membrane; however, it is an important signaling molecule. 

 The charge of the phospholipids is extremely important to the structure of  the membrane. 

o Sphingolipids

 Hydrophilic head: a variable polar group

 Hydrophobic tail: sphingosine 

o Cholesterol

 Hydrophilic head: a variable polar group

 Hydrophobic tail: nonpolar hydrocarbon tail

 In between the head and the tail, there is an inserted steroid ring structure.  This structure is comprised of four flat and rigid rings. 

∙ Lipid Self­Assembly

∙ Bilayers

 The donut is an extremely versatile structure; however, it does not form  naturally. This structure is created in labs and used to study cell delivery  and trapping substances in the middle of the structure.

∙ Monolayers

o Biological monolayers add more structural integrity to the bacteria, and benefit  the bacteria’s living. 

 More specifically the bacteria are thermophiles, which are a type of  bacteria that live in extremely hot environments. 

 The unique tails of the lipids are joined together to form the monolayer,  this process is extremely messy because the tails of the phospholipids are  constantly in motion. 

 These can also form spheres, such as LDL particles which deliver 

cholesterol from the liver to all of the cells. The sphere encases the 

cholesterol molecule.

∙ Lipids are Fluids

o Movement of lipids

 Lipids can actually move in a bilayer sheet. 

∙ Lateral diffusion is when the phospholipids move horizontally in  the membrane. This process is viscous, more so toward the heads 

because the tails are packed into the membrane tightly. 

∙ Flexation is when the fatty acid chains of the hydrophobic tails 

change the distance between them. 

∙ Rotation is when the individual phospholipid rotates in its 

position.

∙ Transverse diffusion is when a phospholipid moves from one side of the bilayer to the other, which is rare. This requires a flipase 

enzyme because the hydrophilic head must be pushed through the 

hydrophobic tail region of the bilayer. 

o Transition temperature

 The fluidity of the bilayer is temperature dependent. 

∙ Below the transition temperature, the membrane has a gel like 

consistency but over the transition temperature gives the 

membrane a fluid like consistency. 

∙ Transition temperature is directly proportional to fatty acid chain length and the degree of saturation.

o A longer chain and higher saturation cause the transition 

temperature to increase. 

∙ Long, saturated fatty acid chains decrease the fluidity of the bilayer because the tails are more highly ordered and more difficult to 

melt. Unsaturated tails are more disorder and less stable, which 

makes them easier to break. 

∙ Which property, saturation or length contributes more to the 

fluidity/ transition temperature of the membrane?

o Saturation has a much bigger influence than the length of 

the fatty acid chain.

∙ The fluidity of the membrane is also influenced by the sterol 

content, because the sterol inserts itself between the phospholipids 

and sphingolipids. And due to the rigidity of the sterol group, the 

membrane will also become rigid. 

o Does cholesterol make the membrane more or less fluid?

At physiological temperatures cholesterol decreases the 

fluidity of the membrane, however at lower temperatures 

cholesterol actually makes the membrane more fluid. Thus, 

it is temperature dependent. 

∙ Composition of lipids leads to 

o an asymmetry in charge 

 Biological membranes are asymmetric; thus, the outer and inner 

membrane composition of lipids are not identical. There is usually a 

charge differential across the membrane. 

o regulates curvature

 The composition of the membrane matters! It contributes to the width of  the inner and outer leaflets and the curvature of the membrane. 

∙ A group with a smaller head is used in the inner leaflet because it 

causes a curve and bends the membrane inward. 

∙ Membrane Associated Proteins

o Integral membrane proteins are tightly associated with the membrane

 Transmembrane proteins go all the way through the membrane. Inside  of the membrane is usually the hydrophobic region with alpha helices.  ∙ These proteins can either be single pass: go through the membrane one time or multiple pass: goes through the membrane two or 

more times. 

∙ Bacteriorhodopsin is 7 pass and the photosynthetic reaction center  is 11 pass. 

∙ They could also have beta barrels that pass through the membrane,  creating a cylinder. These are known as porins. 

∙ These proteins are extremely difficult to isolate from the rest of the membrane. 

 Lipid anchored proteins are covalently attached to the membrane by a  lipid on the protein, which is then buried into the membrane. 

∙ Acylation (fatty acid anchors) has an amide bond between the fatty acid tail buried in the membrane and the protein. 

∙ Prenyl anchors have a thioester bond between the fatty acid tail 

buried in the membrane and the protein. 

∙ These are named by the number of carbons present in the tail.

∙ The lipid anchors can be attached during or post synthesis 

o Peripheral Proteins noncovalently interact with the transmembrane proteins or  lipid binding domains. 

∙ Isolating proteins

o Integral

 Integral membrane proteins can be solubilized with detergents, such as  SDS and Triton­X­100.

 It’s difficult to study these proteins because of the hydrophobic section of  the molecule; it is hard to create a hydrophobic environment in a test tube.   By adding a detergent, the detergent molecules will insert themselves into  the membrane to create a soluble protein­detergent complex. This complex has both the monomers from the detergent and some phospholipids/ 

sphingolipids from the membrane.  

o Peripheral

 These are east to study in lab settings because peripheral proteins can be  separated from the rest of the membrane due to their noncovalent 

interactions. Once these interactions are broken, the peripheral proteins  can ‘fall off’ and be isolated. 

∙ Detecting the movement of proteins in membranes

o Cell fusion

o FRAP

∙ Cells can constrain the movement of proteins

o Epithelial cells

o Lipid rafts are rich in sphingolipids and cholesterol, which form wide and tall  stable structures. The proteins are free to move in the lipid raft; however, it cannot leave the lipid raft.

 Certain proteins have an affinity for lipid rafts.

 These structures are often used for cell signaling. 

o Self­assembly into large aggregates would completely immobilize the protein in the cell membrane Interaction with intracellular macromolecules

o Interaction with extracellular macromolecules

o Interaction with proteins in neighboring cells

 Tight junctions often line ducts and tubules, it rescripts the protein’s  movement because it cannot cross the tight junction. The protein is free to  move within its domain but not into any other domains.  

∙ These junctions are formed when there are interactions between 

proteins on neighboring cells. 

∙ Sodium is able to cross tight junctions

Movement of Small Molecules across membranes ∙ Passive diffusion is protein independent, which means that no energy is consumed and  no protein is used.

o No energy is required because substances will move down the gradient, so  particles will move from high concentrations to low concentrations.

o Gases and small uncharged polar molecules are transported using this method ∙ Transporter­mediated movement of small molecules across membranes requires the help  of a protein transporter in the membrane

o Facilitated diffusion 

 No energy is required because substances will move down the gradient, so particles will move from high concentrations to low concentrations.

 Uses the help of a uniporter, which will move one molecule in one 

direction. The uniporter actually helps catalyze the transport of the 

particles and limits the site of the diffusion.

 Amino acids, nucleosides, and sugars are transported using this method.  GLUT1 is a uniporter that transports glucose into most mammalian cells.  It goes through a conformational change that will transport the glucose 

molecule into the cell where it is immediately made into glucose­6­

phosphate which allows the gradient to remain. It has a higher affinity 

than GLUT2 and passive diffusion (see slide 53) because its km is higher. o Active transport consumes ATP through ATP hydrolysis.

 P­class pump

∙ The sodium potassium pump requires both sodium and potassium 

to bind before it undergoes a conformational change. It pumps 

3Na+ out of the cell and 2K+ into the cell, against its concentration 

gradient. 

 F­class and V­class pump

 ABC superfamily pumps are found in both prokaryotes and eukaryotes. A  well­known pump is MDR1.

∙ This pump was discovered during cancer research because tumor 

cells had a large amount of MDR1. These pumps were pumping 

out the medication, which means that there was no accumulation of

drugs in the cellular space of the tumor cells. It flips a small, polar 

molecule and exports it from the cell. 

 Coupled transport consumes energy that was stored in a concentration  gradient. 

∙ Pumps two molecules, one against its gradient and one with its 

gradient. The pump exploits the energy from the molecule moving 

down its gradient to pump the second molecule against its gradient.

∙ The sodium/ glucose symporter pumps 2Na+ down its gradient 

while pumping one glucose up its gradient. It uses energy by 

making both the sodium and glucose bind before the symporter has

a conformational change that allows transport. 

∙ Transepithelial transport

o Coordination of multiple transport systems

o utilizes all pumps, this allows all parts of the cells to work together and cause a  chain reaction. 

∙ Cystic Fibrosis

o Cystic Fibrosis is a recessive trait that mainly affects Caucasians. The chloride ion channel is mutated, and doesn’t allow the chloride ion to pass from the lung lining into the airway lumen. 

 Symptoms of CF is basically that small ducts become clogged with mucus, more specifically they include: 

∙ clogging and infection of lungs

∙ plugging of small bile ducts in the liver which impedes digestion

∙ plugging of pancreas ducts which impedes digestion

∙ obstruction of the small intestine 

∙ males are infertile due to the block in the vas deferens 

∙ malfunctioning sweat glands

 Collins and Tsiu discovered the CFTR gene located on chromosome 7.  CFTR, cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, is an active  transport protein that requires ATP to bind in order to induce a 

conformational change that would allow a chloride to pass through. 

∙ 2/3 of CF patients have a mutation at position 508, either the 

phenylalanine is missing or the protein is misfolded and results in 

CFTR being absent from the surface of the cell. This means that 

the transporter is not in the membrane and cannot allow the 

chloride ion channel to open, and no chloride ions can pass 

through.

∙ If the chloride ion does not pass through then water cannot pass 

either, which means the mucus on the lining of the airway lumen 

will not be hydrated, resulting in thick mucus to build up and  house pathogens to reside and grow.

Page Expired
5off
It looks like your free minutes have expired! Lucky for you we have all the content you need, just sign up here