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Developmental Biology Exam I Notes

by: Katherine McKeone

Developmental Biology Exam I Notes BIOL 3090-001

Marketplace > University of Toledo > Biology > BIOL 3090-001 > Developmental Biology Exam I Notes
Katherine McKeone

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Notes covering Exam I material
Developmental Biology
Robert Steven
Class Notes
25 ?




Popular in Developmental Biology

Popular in Biology

This 15 page Class Notes was uploaded by Katherine McKeone on Tuesday September 13, 2016. The Class Notes belongs to BIOL 3090-001 at University of Toledo taught by Robert Steven in Summer 2015. Since its upload, it has received 4 views. For similar materials see Developmental Biology in Biology at University of Toledo.

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Date Created: 09/13/16
Developmental Biology Exam I Stages of Development******** 1. fertilization 2. cleavage 3. gastrulation 4. neurulation: nervous system formation 5. organogenesis: formation of organs 6. metamorphosis: common to frogs and insects, change from larval stage to more  complex adult stage. Involves change in morphology of organism “Keep in mind for exam” fucking know it. ******** Embyogenesis ­ Questions of Developmental Biology ­ Differentiation: how does this happen? ­ Morphogenesis: how does this arise? ­ Growth: why does it become larger? Does it deal with complexity? ­ Reproduction: no spontaneous generation of life ­ Evolution (limited time on this section): occurs through changes in developmental  processes.  ­ Approaches to Developmental Biology ­ anatomical ­ Will reading Baron George Leopold Cuvier’s work help in understanding morphology  and anatomical comparisons? ­ experimental ­ genetic ­ Origins of Developmental Biology ­ Aristotle (350BC) ­ preformation: tiny human in sperm ­ Epigenesis: organism is developed from scratch ­ The Cell Theory ­ 1820­1880 ­ All living organisms consist of cells, the basic unit of life ­ All cells come from other cells ­ The Circle of Life, bitches ­ Somatic vs. Germ Cells ­ distinction made by August Weisman ­ Characteristics of offspring determined by germ cells ­ Somatic cells are cells of the body ­ Germ cells are egg and sperm cells ­ Richard Dawkins Selfish Gene 1 ­ How do Cells Become Different from One Another?**** ­ Mosaic Model:  ­ Weisman’s nuclear determinants  ­ Wilhelm Roux’s Experiment ­ Half an embryo formed ­ Did not give a whole embryo because the other cell “thought” that the other cell was still  there” ­ Does not work in frogs  ­ In order for a hypothesis to be “proved” into a theory, does it have to be proved  mathmatically? ­ Regulative Development ­ Hans Driesch ­ Regulation occurs ­ Disproved Mosaic Model ­ Cell­Cell Interactions Proven: ­ Induction: cells can induce cells to differentiate ­ Spemann organizer ­ signalling center. Signals to other cells in the area.  ­ Resulted in another organism formed ­ New cells tell old cells to grow into a second organism ­ Genetics at the Core of Development ­ Genetics: studying the transmission of inheirited traits ­ Embryology: studying the development of organisms with specific traits ­ 1940s: genes encode proteins ­ Basic Genetics ­ Genotype vs phenotype ­ Genotype: genetic makeup ­ Phenotype: physical expression of genotype  ­ allele ­ definition: ­ heterozygous vs homozygous ­ Definition ­ Definition ­ recessive vs dominant ­ definition ­ definition Lecture Two ­ Cleavage ­ division of the fertilized egg into a larger number of cells ­ no increase in cell mass during this stage ­ Different Types of Cleavage***** 2 ­ holoblastic cleavage ­ isolecithal ­ very equal ­ mammals ­ Mesolecithal ­ Zenopus (African clawed frog) ­ some asymmetry  ­ Cleaves completely ­ Meroblastic cleavage ­ telolecithal ­ lots of yolk ­ at one end ­ chicken, birds, avian ­ centrolecithal ­ yolk is central ­ just the nuclei divided in one cell ­ Drosophila  ­ Does not cleave all the way through   ­ Morphogenesis/Pattern Formation ­ Often involves multiple cell behaviors ­ the first pattern formed in development is the overall body plan ­ The Organization of cellular activity in space and time for the formation of structure ­ Morphogenesis: Gastrulation ­ Gastrulation: the dramatic restructuring of the embryo mainly by cell migrations ­ blastula vs gastrula ­ Blastula: cleavage stage ­ Gastrula: movement of cells to generate different layers ­ proteasome vs. deuterostome ­ proteasome: mouth is the first opening to form ­ deuterostome: anus is the first opening to form ­ sea urchins and mammals and vertebrates ­ echinoderms (sea urchins) ­ Morphogenesis: Germ Layers ­ regions of the early embryo that always develop into specific tissue types ­ Triploblasts ­ organisms with three germ layers: endoderm, mesoderm, and ectoderm ­ Endoderm examples ­ Mesoderm layers examples ­ ectoderm layers examples ­ Cell Differentiation ­ The process by which cells become structurally and functionally different from one  another ­ gradual 3 ­ at least 250 different cell types in humans ­ Growth ­ very little growth in early development ­ growth occurs in multiple ways ­ increase in cell number ­ increase cell size ­ deposition of extracellular materials ­ Cell Behavior ­ the link between gene action and developmental processes ­ cells then determine the course of development ­ migrations ­ shape changes ­ differential adhesion ­ division ­ cell­cell signaling ­ cell death ­ Gene Expression and Protein Synthesis ­ Genes are passive participants in development ­ determine when and where proteins are produced  ­ Multiple ways to control protein synthesis ­ not really interested in “housekeeping genes” ­ Complex Control Regions Regulate Gene Expression ­ differentiation: generated by differences in gene expression ­ transcription factors or gene regulatory proteins ­ binds to cis­regulatory modules ­ modules can be interdependent ­ Development is Progressive ***** ­ complexity of the embryo gradually increases over time ­ fate, determination, and specification ­ Fate: final outcome, expected result of normal development ­ Determination: stable change in the internal state of a cell, such that the cell’s state is  now fixed. ­ Specification: when isolated and cultured in the neutral environment of a simple culture  medium away from the embryo, they develop according to their normal fate.  ­ Inductive Interactions ­ a signal from one cell or tissue influences the development of an adjacent group of cells ­ can make cells different from one another ­ distance of action is variable ­ permissive vs. instructive  ­ permissive is a choice of two things ­ Signal Transduction ­ transmission of the signal into the interior of the cell ­ relays of protein­protein interactions within the cell 4 ­ phosphorylation is key ­ Cells must be competent to Receive a Signal  ­ example is lens induction  ­ small distances ­ Genetic Specificity of Induction  ­ Patterning from Positional Information***** ­ Cells can acquire an identity based on their position ­ Once positional value is obtained cells interpret it to differentiate properly ­ Position signaled by a morphogen: ­ A chemical whose concentration varies and which is involved in pattern formation  ­ A substance involved in pattern formation whose spatial concentration varies and to  which cells respond differently at different threshold concentrations ­ Cytoplasmic Determinants and Asymmetric Divisions ­ Certain molecules (determinants) are distributed unevenly within the cell ­ Determinants distributed unevenly during cell division ­ Determinants at some point specify a particular fate to the cell that contains them ­ Asymmetric Divisions: Stem Cells ­ Stem cells undergo a special type of asymmetric cell division ­ Undifferentiated cells that divide to produce more stem cells along with other cells that  go n to differentiate  ­ Capable of repeated divisions ­ Pluripotent ­ Give many different types of cell types ­ Hematopoietic stem cells ­ Totipotent ­ Go on to give  a whole organism ­ Zygote  ­ DNA is NOT a Blueprint for an Organism ­ DNA does not contain a full description of the organism to which it will give rise ­ The genome instead contains a generative program of instructions for making the  organism ­ DNA is a blueprint for the primary structure of proteins Lecture Three ­ Drosophila as a Model Organism ­ Originally for studies on the rules of genetic inheritance  ­ Small (3mm), easy to handle, short (2 weeks) life cycle ­ Used in genetic screens for development genes ­ Similar genes are found in mammals ­ Drosophila Embryo Cleavage ­ Rapid nuclear division, without the formation of cells ­ Creates syncytium: cell with multiple nuclei and a common cytoplasm 5 ­ After three hours membranes grow in from the surface to enclose nuclei and form cells ­ Drosophila Gastrulation ­ Mesoderm (muscle); ventral  ­ Endoderm (gut); poles ­ Both move inside during gastrulation ­ Mesoderm moves first forming a ventral furrow; then a tube ­ Ectoderm remains as the outer layer forming an epidermis ­ Inward movement of cells ­ Migrating mesodermal cells create the ventral flow ­ Segmentation becomes visible during germ­band extension ­ Drosophila First Instar Larva ­ Acron: anterior specialized structure ­ Telson: posterior specialized structure ­ Denticles: small tooth­like outgrowths from the surface of the larvae ­ Each bristle segment has a recognizable denticle and bristle pattern  ­ CLICKER: Drosophila embryos are classified as centrolecithal  ­ Patterning of the Drosophila Embryo ­ AP and DV axes laid out in egg ­ AP axis in embryo are divided into parasegments ­ Individual developmental units (compartments) that give rise to the segments ­ Screening for Developmental Mutants***** ­ Screen ­ EMS mutagen ­ Balancer chromosome ­ Saturating screen ­ When screen is done enough, you start finding the same type of mutations ­ Maternal Effect Mutations ­ The genotype of the mother is expressed in the phenotype of its offspring ­ Paternal contribution has no effect ­ Setting Up the Body Plan: Sequential Gene Expression***** ­ Maternal genes: expressed by the mother in the tissues of the ovary ­ Maternal gene products laid down in egg ­ They provide positional information ­ This info activates the zygotic genes, which act sequentially.   ­ Specification of the AP Axis ­ Roles of maternal genes identified by the effects of mutations ­ Three classes of maternal genes ­ anterior ­ posterior ­ Terminal ­ CLICKER ­ A protein that is found in a concentration gradient and influences a cell’s  developmental outcome is called a morphogen 6 ­ Bicoid is Localized in the Anterior  ­ mRNA distribution is analyzed by in situ hybridization  ­ Protein distribution is determined by antibody staining ­ After fertilization, Bicoid protein is produced in the anterior but diffuses to produce AP  gradient.  ­ Bicoid is a Morphogen ­ Conclusion based on genetic and physical experiments ­ Cytoplasm transfer experiments reveal the importance of Bicoid ­ A transcription factor  ­ Controls GAP genes Lecture Four ­ Screening for Developmental Mutants ­ Screen ­ EMS mutagen ­ Balancer chromosome  ­ Saturating screen ­ Posterior Group Maternal Genes ­ Gradients of nanos and caudal control posterior patterning ­ Caudal is a morphogen ­ Also specify the germplasm in the egg ­ Nanos Protein Functions to Establish a Maternal Gradient of Hunchback Protein ­ Nanos is not  a morphogen ­ Nanos suppresses the translation of maternal hunchback mRNA.  ­ Loss of Maternal hunchback Suppresses nanos Mutants ­ Remove the maternal hunchback protein in nanos mutant animals ­ These animals have a WT phenotype ­ Conclusion: Nanos functions to decrease maternal hunchback in the embyro  ­ Caudal  ­ Also required to pattern the posterior embryo ­ Caudal mutants have missing abdominal segments  ­ Maternal mRNA is evenly distributed  ­ Posterior to anterior protein gradient formed by inhibition of Caudal protein synthesis by  Bicoid ­ Green bicoid, red caudal ­ Terminal Group Maternal Genes ­ Specify structures at the ends of the embryo ­ Terminal regions are specified together (same molecular pathway), despite the distance between them ­ Torso is a Receptor Tyrosine Kinase ­ Distributed everywhere in the membrane of the fertilized egg ­ Activated by a ligand only present at the ends of the egg 7 ­ Ligand is the trunk protein ­ Signal transduction pathway activates zygotic genes in the termini ­ Dorsal­Ventral Polarity ­ Ligand: Spatzle fragment  ­ Expressed in ventral follicle cells in the ovary ­ Receptor: Toll ­ Present throughout the membrane of the egg ­ Activated Toll causes the transcription factor Dorsal to enter the nearby nuclei ­ Toll Activation Affects Dorsal Localization  ­ Dorsal is a morphogen ­ The Toll Signaling Pathway***** ­ Activated Toll binds to an adaptor protein ­ This initiates a pathway leading to the breakdown of the inhibitory protein Cactus ­ Dorsal is free to move into the nucleus  ­ NFkB in mammals ­ Toll pathway is multifunction ­ CLICKER ­ EMBRYOS WITH DEFECTIVE DORSAL GENE ARE DORSALIZED ­ Drosophila Egg Development ­ Germline stem cell divides to generate a stem cell and a cytoblast, which divides to give 16 cells ­ One becomes the oocyte ­ Others are nurse cells ­ Follicle cells have a critical role in patterning  ­ Cells of the mother ­ Somatic cells ­ A/P Polarity: Signals from Older to Younger Egg Chambers Polarize the Oocyte ­ First evidence of A/P polarity is the posterior positioning of the oocyte in the cyst.  ­ A series of signals from the previous cyst determines which germ cell will develop into  the oocyte ­ Oocyte and posterior follicle cells specifically express the adhesion molecule E­ cadherin.  ­ Oocyte­Follicle Cell Interactions ­ A/P and D/V axes are established by interactions involving Gurken ­ Activates the receptor Torpedo ­ Torpedo is a RTK  ­ Signal specifies posterior follicle cells ­ Follicle cells signal back causing rearrangement of cytoskeleton ­ Gurken further induces Dorsal follicle cells.  ­ mRNA Localization in the Egg ­ Bicoid mRNA transported to anterior on MT (microtubules) towards the “­” end ­ Nanos mRNA transported to posterior on MT towards “+” end 8 ­ CLICKER ­ Follicle cells are part of the ovary  ­ Clicker ­ A saturating screen means multiple alleles were found for each gene identified in  the screen.  ­ Dorsal Protein Controls the Expression of Zygotic Genes on the DV Axis ­ Dorsal activity defines broad regions of the DV axis ­ Has two types of activities: activation or repression of genes ­ Twist and snail are activated by high levels of Dorsal (ventral) ­ Rhomboid activated by low levels of Dorsal ­ Dpp repressed by Dorsal ­ Concentration of Dorsal Determines Which Genes are Activated ­ Decapentaplegic is a Morphogen for the Dorsal Region ­ Embryo now cellular; transcription can’t diffuse between nuclei ­ Dpp is a secreted signalling protein (TGF­beta family member) Lecture Five ­ The Effects of Mutations in the Zygotic Developmental Genes ­ Gap mutants lack large regions of the body ­ Activates Pair Rule ­ Pair rule mutants lack portions of  every other segment ­ Activates segmentation  ­ Segmentation mutants have defects in every segment.  ­ The AP Axis is Divided into Broad Regions by Gap Gene Expression ­ Gap genes are the first zygotic genes expressed along the AP Axis ­ All encode transcription factors ­ Bicoid activates hunchback, which activates other Gap genes ­ mutants : large regions of body pattern missing in the AP axis ­ Missing regions, in general, correspond to where the gene is expressed.  ­ Maternal Bicoid Protein Controls Zygotic hunchback  Expression ­ Hunchback is turned on only when the transcription factor Bicoid is at a certain  threshold level ­ This level obtained only in the anterior ­ Bicoid binds the hunchback Promoter ­ Hunchback expression can be monitored using a lacZ reporter fusion gene ­ Hunchback promoter fused to the bacterial lacZ gene ­ Blue stain represents the level of expression ­ Promoter “bashing” experiments defined an essential 263 bp region ­ Hunchback Protein Activates and Represses Other Gap Genes ­ Hunchback is another transcription factor that acts as a morphogen ­ Limits of gap gene expression determined by Bicoid and Hunchback ­ Example: kruppel activated by Bicoid and intermediate levels of hunchback 9 ­ High Hunchback levels represses kruppel expression.  ­ Relationship Between Parasegments and Segments ­ Segmentation an obvious feature of larvae ­ Parasegments: ­ Individual developmental units (compartments) in the Drosophila embryo that gives rise  to segments ­ Visualized by gene activity ­ Offset from segments by half a segment ­ Expression of Pair­Rule Genes ­ Genes are expressed in 7 stripes just before cellularization ­ All pair­rule genes expressed in alternate parasegments  ­ Generation of the Pair­Rule Stripes ­ Bicoid and Hunchback activate eve in a broad domain ­ Giant and Kruppel proteins represses eve to define the borders ­ Repressors override activators ­ One even­skipped cis­Control Region ­ The promoter region is complex ­ Seven different cis­control regions: one for each stripe ­ Each region has multiple binding sites for each of the transcription factors ­ CLICKER ­ Are all transcription factors morphogens? ­ No ­ Segmentation Genes ­ Activated in response to the pair­rule genes ­ Expressed in 14 transverse stripes ­ Example is engrailed ­ Engrailed Delimits the Anterior Parasegment Boundary ­ Expressed throughout the life of the fly ­ Delimits a cell­lineage boundary ­ Defines a compartment ­ Segmentation Genes ­ Affect segmentations patterns visualized on the larval cuticle ­ Normal patterning depends on the stabilization of segment boundaries ­ Wg and hh mutants have denticles completely covering abdomen ­ Anterior region duplicated in mirror image ­ Expression of Segmentation Genes ­ Segmentation genes stabilize segment boundaries ­ Hh and wg expressed on either side of the parasegment boundary ­ Patched localized to cells without hh.  ­ The Hedgehog and Wingless Signalling Pathways ­ Pathways involved in the intracellular signalling circuit set up between adjacent cells,  which delimits the bundary between them  ­ Hh and Wg are the secreted signal proteins (ligands) 10 ­ Patched and Frizzled are receptors ­ Aslo involved in other aspects of development ­ Important roles in vertebrates as well ­ Hedgehog signaling Pathway ­ Wingless Signalling Pathwya Dropsophila Hox genes are controlled by pair rule genes Gastrulation occurs mainly because of this behavior: cell migrations  ­ Wg and Hh Signaling Circuit ­ En expressing cells secret Hh  ­ Hh diffues over the compartment boundary to activate and maintain wg expression in  the adjacent cells ­ Wg feeds back to maintain hh and en expression in cell’s posterior ­ Segment Identity is Specified by Hox Gene ­ First evidence of genes that specify segment identity came from the observation of  mutations that produced homeotic transformations ­ Genes affected are called Hox genes ­ These contain a homeobox ­ Considered one of the fundamental defining features of multicellular animals ­ All act in a similar way, specifying identity along the A/P axis ­ Drosophila HOM Complexes ­ Two Hox gene clusters in Drosophila ­ Antennapedia complex controls the development of anterior parasegments ­ Bithorax complex controls posterior parasegments ­ Striking co­linearity between the spatial and temporal gene expression patterns and  their order on the chromosome  ­ Bithorax Complex Mutations ­ Flies with bithoraxoid mutation have the anterior portion of the haltere transformed into  part of a wing ­ A double mutant of bithoraxoid and postbithorax results in a complete wing instead of a  haltere.  ­ Antennapedia Complex Mutations ­ Flies with the dominant Antennapedia mutation have…  ­ Combinatorial Activity of the Hox Gene Defines the character of each segment ­ Gap and pair­rule genes determine the bithorax gene expression pattern ­ Conclusion: segment identities are likely determined by variations in the spatial and  temporal expression patterns of the Hox gene.  ­ Other Points about the Hox Gene ­ Many transcription factors contain homeobox sequences, but are not part of the Hox  gene clusters 11 ­ We don’t know the downstream targets of the Hox genes.   Lecture Six ­ Vertebrate Body Plan ­ Vertebral column: segmented backbone that surrounds the spinal cord ­ Defines the A/P axis ­ D/V axis: mouth ventral, spine dorsal ­ Mainly bilaterally symmetric  ­ Differences and Similarities ­ Egg size ­ Different appearance before gastrulation ­ Different amount of yolk ­ Phylotypic stage: stage after gastrulation when embryos appear similar  ­ Xenopus laevis ­ African claw­frog ­ Develops normally in tap water ­ Eggs are easy to obtain ­ Eggs are large and hardy enough for manipulation ­ Fragments and cultures well ­ Xenopus egg ­ Distinct polarity ­ Animal region: dark and pigmented ­ Vegetal region: pale, yolky, and heavy ­ Cleavage of the Xenopus Embryo ­ No cell growth so cells become smaller with each division ­ Cleavage occurs synchronously ­ Blastomeres: Cells derived from cleavage divisions ­ Blastula: Spherical mass of cells with a fluid filled cavity inside; cavity is called the  blastocoel ­ Xenopus Gastrulation***** ­ Gastrulation begins at the blastopore ­ Involution ­ Epiboly: the spreading of the ectoderm to cover the whole embryo ­ Archenteron ­ Amphibian Neurulation ­ First indication is formation of neural folds ­ Embryo is called a nerula  ­ This tissue folds and fuses to form the neural tube ­ Neural crest cells detach from the tube to form other tissues ­ Chicken Life Cycle ­ Similar development to mammals especially in gastrulation and later ­ Easier to obtain and visualize  ­ Chicken Egg 12 ­ Blastoderm: flat embryo several cells thick ­ Albumen: egg white ­ Chalaza: cord like balancer for the yolk ­ Shell is made of calcium carbonate ­ Cleavge and Epiblast Formation ­ Hypoblast: layer of cells forming the floor of the cavity ­ Epiblast: remaining blastoderm that forms the embryo ­ Gastrulation begins with the formation of the primitive streak ­ Ingression: Cells move inward individually (not as a sheet) ­ Mesenchyme: a loose collection of cells ­ Chick Gastrulation ­ Hensen’s node: a condensation of cells at the anterior end of the primitive streak in  chick and mouse embryos.  ­ Regression of Hensen’s Node: ­ After inward cell migrations stop the primitive streak regresses ­ Notochord forms from mesoderm anterior to the regressing node ­ Neurulation in the Chick Embryo ­ Neural folds on either side of the neural plate ­ Progression anterior to posterior ­ Discussion Questions from Blackboard ­ Gain of function mutations are typically dominant in nature while loss of function are  recessive.  ­ Chick Embryo Development ­ Somite: areas of development ­ 13­, 22­, and 40­ somite stages ­ Stained with the early mesoderm and notochord marker Brachyury ­ Extra­Embryonic Structures of the Chick Embryo***** ­ Membranes: Chorion, allantois, amnion, and yolk sac  ­ Fluid­filled amniotic cavity provides protection ­ Allantosis:  site of oxygen and carbon dioxide exchange  Lecture Seven ­ CLICKER QUESTION ­ Do the embyros at the phylotypic stage look similar in all species?  ­ Yes ­ Mouse Life cycle ­ 9 week life cycle is relatively short for mammals ­ Egg is small and has no yolk ­ Cleavage in the Mouse Embryo***** ­ Asynchronous cell divisions: ­ Every 12 hours (relatively slow) 13 ­ After the eight cell stage, compaction occurs to form the morula ­ The early cleavage stage embryo (a solid ball of cells) ­ Blastocyst: Composed of inner cell mass and trophectoderm ­ ICM forms the embryo and extra­embryonic structures ­ Trophectoderm forms just extra­embryonic structures ­ Ex: placenta ­ Came from the embryo but do not form the final embryo product.  ­ First Differentiation Event ­ Early mouse embryo is highly regulative; cells determined only after 32­ cell stage ­ Argues against the importanc of maternal determinants ­ All cells are totipotent up until the 32­cell stage. ­ After this point, the cells can only become cells of the embryo and are therefore  pluripotent.  ­ Regulation in Mouse Embryo Development ­ Can pull cells out to generate cell lines ­ Can take cells out and embryo will be fine, add them and the embryo will be fine ­ This indicates that there is regulation involved to form the appropriately sized mouse.  ­ Post­Implantation Development ­ ICM divides into two regions: epiblast and primitive endoderm ­ Primitive endoderm contributes to extra­embryonic membranes ­ Epiblast develops into the embryo (and some extra­embryonic structures) ­ Pluripotent ­ Cup shape is peculiarity of rodents: other mammals (vertebrates??)  like chick and  humans have flat early embryos.  ­ Gastrulation in the Mouse Embryo ­ Epiblast cells converge in the posterir and migrate through to spread out laterally and  anteriorly ­ Node: Equivalent to Spemann organizer region ­ Clicker  ­ Which region gives rise to all embryonic tissues? ­ Epiblast ­ Human Life Cycle ­ 38 weeks from fertilization to birth ­ Embro: between implantation and 8 weeks ­ Fetus: after 8 weeks until birth ­ Early Mammalian Development ­ Placenta: structue formed in th euterine wall where the blood systems of mother and  embryo interfce to exchange nutrients and waste products.  ­ Ectopic pregnancy: when the egg implants in the fallopian tube ­ Human Embryos are Regulative: Monozygotic Twins ­ Indentical twins ­ Have the same set of DNA 14 ­ Embryo splits early in developments.  ­ Can have two chorians ­ Can have one chorian but two amnions ­ Can have one amnion (can result in conjoined twins) ­ Human Gastrulation and Changes in the Extraembryonic Membranes ­ Amniocentesis: The sampling and analysis of fluid from the amniotic cavity, usually  performed at 14­20 weeks ­ Checking the genetics of that embryo ­ Clicker ­ The cells of the ICM are pluripotent ­ Sperm Entry Defines the Future Dorsal side of the Xenopus Embryo***** ­ Sperm entry occurs anywhere in the animal hemisphere ­ In regards to sperm entry of an amphibian: Could there be a cell surface receptor on the particular hemisphere?  ­ Cortical rotation: cytoplasm in the cortex loosesn and rotates away from the site of  sperm entry ­ Involves the orientation of MTs away from the sperm entry site ­ Maternal factors: beomces relocated opposite site of sperm entry.  ­ Wnt Signaling Pathway ­ Segmentation gene ­ Activates things on the dorsal side of the embryo  ­ Clicker ­ The position of the Xenopus blastopore is determined by the site of sperm entry  anf Wnt signaling  ­ Beta Catenin Has a Dorsalizing Effect ­ Injection of beta­catenin results… ­ Gravity Defines the Chick A/P Axis 15


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